反相高效液相色谱,反相高效液相色谱为什么用磷酸调节ph首先,高效液相色谱法所需的分析时间较之经典液相色谱法少得多，一般少于1h。高效液相的原理,高效液相色谱分析的基本原理高效液相色谱仪（HPLC）是应用高效液相色谱原理，主要用于分析高沸点不易挥发的、受热不稳定的和分子量大的有机化合物的仪器设备。

分类:教育/学业/考试解析:高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上，引用了气相色谱的理论，在技术上，流动相改为高压输送（最高输送压力可达4.9´107Pa）;色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成，从而使柱效大大高于经典液相色谱（每米塔板数可达几万或几十万）；同时柱后连有高灵敏度的检测器，可对流出物进行连续检测。特点1．高压：液相色谱法以液体为流动相（称为载液），液体流经色谱柱，受到阻力较大，为了迅速地通过色谱柱，必须对载液施加高压。

2.高速：流动相在柱内的流速较经典色谱快得多，一般可达1～10ml/min。高效液相色谱法所需的分析时间较之经典液相色谱法少得多，一般少于1h。3.高效：近来研究出许多新型固定相，使分离效率大大提高。4.高灵敏度：高效液相色谱已广泛采用高灵敏度的检测器，进一步提高了分析的灵敏度。如荧光检测器灵敏度可达1011g。另外，用样量小，一般几个微升。

它是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，经进样阀注入待测样品，由流动相带入柱内，在柱内各成分被分离后，依次进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。高效液相色谱法（HighPerformanceLiquidChromatography，简称HPLC）又叫做高压或高速液相色谱、高分离度液相色谱或近代柱色谱,

【简介】它是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，经进样阀注入待测样品，由流动相带入柱内，在柱内各成分被分离后，依次进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。这种方法已成为化学、生化、医学、工业、农业、环保、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术，是分析化学、生物化学和环境化学工作者手中必不可少的工具。

高效液相色谱仪（HPLC）是应用高效液相色谱原理，主要用于分析高沸点不易挥发的、受热不稳定的和分子量大的有机化合物的仪器设备。它由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱（固定相）内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中做相对运动时，经过反复多次的吸附解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来。

首先,根据物质的紫外吸收确定波长.比如A物质扫描全波长紫外图谱,确定它在254nm波长下有最大吸收,另外有末端吸收,那么波长就可以选择254nm或者210nm；其次,根据物质的极性选择色谱柱和流动相比例.比如极性很小的物质,就可以把流动相中的有机相比例增大.另外的一些要根据物质的特性来选择,比如色谱峰容易拖尾,可选择缓冲盐和扫尾剂,

首先，根据物质的紫外吸收确定波长。比如A物质扫描全波长紫外图谱，确定它在254nm波长下有最大吸收，另外有末端吸收，那么波长就可以选择254nm或者210nm；其次，根据物质的极性选择色谱柱和流动相比例。比如极性很小的物质，就可以把流动相中的有机相比例增大。另外的一些要根据物质的特性来选择，比如色谱峰容易拖尾，可选择缓冲盐和扫尾剂，比如某些酸性化合物或者碱性化合物可以用离子对试剂。

反相色谱法是以表面非极性载体为固定相，以比固定相极性强的溶剂为流动相的种液相色谱分离模式．反相色谱固定相大多是硅胶表面键合疏水基团，基于样品中的不同组分和疏水基团之间疏水作用的不同而分离．在生物大分子分离中，多采用离子强度较低的酸性水溶液，添加一定量乙腈、异内醇或甲醇等与水互溶的有机溶剂作流动相．普通的反相色谱固定相和孔径大于300Å的硅胶键合烷基固定相应用较为普遍，聚合物基质的反相色谱固定相也有较多应用．反相色谱中样品的保留值主要由固定相比表面积、键合相种类和浓度决定，保留值通常随链长增长或键合相的疏水性增强而增大，对于非极性化合物通常遵循以下规则：(弱)非键合硅胶&<&<氰基7、正向高效液相色谱原理?反相高效液相色谱,正相分配色谱,反相分配色谱...

这问题问的，太不具体了！原理一句两句说不清，简单的说：正相：固定相极性大于流动相的极性，比如固定相是硅胶柱，流动相是正己烷；反相正好相反，固定相极性小于流动相的极性，比如固定相是C18柱，流动相是甲醇；原理就是不同物质在流动相和固定相的化学作用力不同保留情况不同，因此把不同物质分开；。色谱柱填料可以由基质直接构成，如硅胶、氧化铝、高交联度的苯乙烯二乙烯苯或者甲基丙烯酸酯等等；也可以在这些基质的基础上涂布或化学键合固定液来构成，如：最经典的各种ODS柱、氨基柱、氰基柱等。